作者:依利特 來源:液相售后 2025-09-18 09:36:23
初次走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室,難免會被一臺臺管線交錯、屏幕跳動著曲線的儀器吸引又困惑 —— 比如高效液相色譜儀(HPLC)。它不像燒杯、試管那樣拿起就能操作,也不像顯微鏡那樣直觀看到畫面,但作為分析化學(xué)、環(huán)境科學(xué)、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域的基礎(chǔ)設(shè)備,掌握它不僅能順利完成實(shí)驗(yàn)任務(wù)、推進(jìn)研究項(xiàng)目,更能幫你建立系統(tǒng)的 “科學(xué)分析思維”。今天,我們用通俗的語言,帶你輕松認(rèn)識 HPLC,搞清楚它是什么、怎么用、能解決哪些實(shí)際問題。
先搞懂:HPLC 到底是 “什么工具”?
不用被 “高效液相色譜儀” 的長名稱嚇退,其實(shí)可以把它理解成一臺 “超級精準(zhǔn)的物質(zhì)分揀機(jī)”—— 核心作用就是幫我們 “拆分混合物、弄明白里面有哪些成分,以及每種成分有多少”。
比如想知道中藥提取液里有沒有目標(biāo)活性成分、含量是否達(dá)標(biāo);或是檢測飲料中的甜味劑是否超量;又或是分析湖水樣本里是否含有微量污染物 —— 這些 “搞清楚成分” 的需求,都能靠 HPLC 實(shí)現(xiàn)。它的工作邏輯很簡單:讓含有多種物質(zhì)的 “樣品溶液”,跟著 “流動相”(可以理解成 “運(yùn)輸液體”)通過 “色譜柱”(相當(dāng)于 “分揀通道”)。由于不同物質(zhì)在 “通道” 里的 “移動速度不同”,終會逐個分開,再由檢測器記錄成 “色譜圖”—— 圖上的每個 “峰” 對應(yīng)一種物質(zhì),峰的高低還能算出該物質(zhì)的含量。
入門階段不用追求精通所有原理,先記住它的核心功能:幫我們 “定性”(判斷樣品里有什么)和 “定量”(確定每種成分有多少),這就足以應(yīng)對大部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和初期研究了。

表格1:HPLC 核心部件與功能
常見的 HPLC 應(yīng)用場景:這些情況你大概率會遇到
不同領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)需求不同,但用 HPLC 解決的核心問題都圍繞 “分析成分” 展開。看看下面這些場景,有沒有貼合你的研究方向?
基礎(chǔ)分析實(shí)驗(yàn):練手 “核心操作”
這是大多數(shù)人第一次接觸 HPLC 的場景。通常會從 “標(biāo)準(zhǔn)樣品檢測” 開始 —— 比如用已知濃度的維生素 C 溶液,通過 HPLC 測出它的色譜圖,再根據(jù) “峰面積” 反推濃度,驗(yàn)證儀器的準(zhǔn)確性。
這類實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)不是追求復(fù)雜,而是幫你熟悉基礎(chǔ)流程:怎么按比例混合水和甲醇配制流動相、怎么正確安裝色譜柱、怎么將樣品溶液注入儀器、怎么解讀色譜圖上的峰形和數(shù)據(jù)。這些操作就像 “學(xué)騎車先練平衡”,后續(xù)更復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)都需要這些基礎(chǔ)技能打底。
環(huán)境 / 食品分析:解決 “實(shí)際檢測問題”
如果關(guān)注環(huán)境領(lǐng)域,可能會做 “水體污染物檢測”。比如,科研人員采集某河流的水樣,這條河流周邊存在工廠,懷疑有工業(yè)廢水污染。水樣經(jīng)過過濾、萃取等前處理后,用 HPLC 檢測里面的酚類、烴類等污染物。曾有研究通過 HPLC 發(fā)現(xiàn)某河流中酚類污染物含量超出正常標(biāo)準(zhǔn),為后續(xù)河流治理提供了關(guān)鍵依據(jù),判斷水質(zhì)是否符合標(biāo)準(zhǔn)。
如果聚焦食品相關(guān)研究,大概率會接觸 “食品添加劑檢測”。像在檢測某品牌果汁時,利用 HPLC 測其中的防腐劑(如山梨酸鉀)、甜味劑(如阿斯巴甜)含量,確認(rèn)是否符合安全規(guī)范。曾有食品監(jiān)管部門通過 HPLC 檢測,發(fā)現(xiàn)部分小品牌果汁存在山梨酸鉀超標(biāo)問題,保障了消費(fèi)者的食品安全。
這類實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于 “樣品前處理”(比如如何去除雜質(zhì),避免污染儀器)和 “數(shù)據(jù)解讀”(如何從復(fù)雜的色譜圖中找到目標(biāo)峰,排除干擾信號),能讓你直觀感受到儀器如何解決現(xiàn)實(shí)中的檢測需求。
科研項(xiàng)目推進(jìn):助力 “數(shù)據(jù)產(chǎn)出”
在開展研究項(xiàng)目(比如畢業(yè)設(shè)計(jì)、課題研究)時,HPLC 會成為重要的 “數(shù)據(jù)支撐工具”。比如:
做 “藥物合成” 相關(guān)研究:用 HPLC 檢測合成產(chǎn)物的純度,判斷是否含有雜質(zhì)(雜質(zhì)過多會影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果)。在研發(fā)一款新型降壓藥時,科研人員通過 HPLC 不斷檢測合成藥物的純度,優(yōu)化合成工藝,確保藥物的有效性和安全性。
做 “生物樣本分析”:比如檢測血清、尿液中的代謝物含量,對比不同實(shí)驗(yàn)分組的差異,為研究結(jié)論提供數(shù)據(jù)依據(jù)。在一項(xiàng)關(guān)于糖尿病的研究中,研究人員通過 HPLC 檢測不同患者血清中的特定代謝物含量,發(fā)現(xiàn)了與糖尿病病情發(fā)展相關(guān)的生物標(biāo)志物。
做 “材料性能研究”:分析新型吸附材料對污染物的吸附效果,通過 HPLC 檢測吸附前后溶液中污染物的濃度變化,驗(yàn)證材料性能。某科研團(tuán)隊(duì)研發(fā)了一種新型活性炭材料用于吸附水中的重金屬有機(jī)物,利用 HPLC 清晰地檢測出材料吸附前后水中污染物濃度的降低,有力證明了材料的高效吸附性能。
這時你會發(fā)現(xiàn),HPLC 不再是 “實(shí)驗(yàn)室里的陌生設(shè)備”,而是能幫你產(chǎn)出可靠數(shù)據(jù)、推進(jìn)研究進(jìn)度的關(guān)鍵幫手。

表格2:HPLC 應(yīng)用場景與價(jià)值表
用 HPLC 的 “避坑小技巧”:少走彎路的實(shí)用經(jīng)驗(yàn)
剛開始操作 HPLC 時,很容易因細(xì)節(jié)疏忽導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失?。ū热缟V圖出不來、峰形紊亂),記住這幾個小技巧,能幫你減少麻煩:
流動相配制:細(xì)節(jié)決定實(shí)驗(yàn)成敗
流動相是 HPLC 的 “動力核心”,配錯一步就可能影響整個實(shí)驗(yàn)。比如按要求配制 “甲醇 - 水(50:50)” 的流動相時,一定要用 “色譜純” 試劑(普通試劑中的雜質(zhì)會產(chǎn)生干擾峰,影響結(jié)果),并且嚴(yán)格按比例混合均勻。配好后必須進(jìn)行 “脫氣處理”(用超聲儀去除液體中的氣泡,氣泡會導(dǎo)致泵壓不穩(wěn)定,讓色譜圖峰形混亂)。
很多人初期會圖省事用分析純試劑,或省略脫氣步驟,結(jié)果實(shí)驗(yàn)做了半天卻得不到有效數(shù)據(jù),反而浪費(fèi)時間。
進(jìn)樣操作:慢一點(diǎn)、準(zhǔn)一點(diǎn)
進(jìn)樣是容易產(chǎn)生誤差的環(huán)節(jié)之一。如果用手動進(jìn)樣器,要先將樣品溶液 “潤洗進(jìn)樣針”(避免針管內(nèi)殘留的空氣或其他液體影響結(jié)果),推針時速度要均勻,不要過快或過慢,進(jìn)樣后及時拔出針頭,防止污染儀器內(nèi)部管路;
如果用自動進(jìn)樣器,也要提前確認(rèn) “樣品瓶內(nèi)溶液是否足量”“進(jìn)樣體積設(shè)置是否正確”—— 曾有人因樣品量不足,導(dǎo)致自動進(jìn)樣針吸不到液體,儀器空轉(zhuǎn)半小時才發(fā)現(xiàn)問題,耽誤了實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
實(shí)驗(yàn)后清洗:保護(hù)儀器也方便他人
HPLC 使用后,必須按規(guī)范清洗色譜柱和儀器系統(tǒng)。比如用了含鹽的流動相,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要先用純水將系統(tǒng)徹底沖洗干凈,再用甲醇封存色譜柱(鹽類殘留會結(jié)晶堵塞色譜柱,導(dǎo)致下次使用時儀器報(bào)錯)。
不少人做完實(shí)驗(yàn)后急于整理數(shù)據(jù),忽略了清洗步驟,不僅會縮短色譜柱壽命,還可能影響下一次使用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至需要承擔(dān)耗材更換的成本。

表3:HPLC 操作避坑與維護(hù)表
相關(guān)產(chǎn)品推薦:1、高效液相色譜儀 2、超高效液相色譜儀 3、制備液相色譜儀 4、專用液相色譜儀
掌握 HPLC 的意義:不止是 “會用儀器”
或許你會覺得 “只要完成實(shí)驗(yàn)就行,不用深入了解”,但實(shí)際上,掌握 HPLC 能帶來的遠(yuǎn)不止操作技能:
培養(yǎng) “嚴(yán)謹(jǐn)思維”:HPLC 對操作細(xì)節(jié)要求高,一步失誤就可能導(dǎo)致數(shù)據(jù)偏差,長期使用會讓你養(yǎng)成 “實(shí)驗(yàn)前查流程、操作時記數(shù)據(jù)、結(jié)束后復(fù)盤問題” 的習(xí)慣,這種嚴(yán)謹(jǐn)性在任何研究或工作中都至關(guān)重要;
理解 “科學(xué)邏輯”:通過 HPLC 實(shí)驗(yàn),你會逐漸掌握 “用儀器驗(yàn)證假設(shè)” 的思路(比如假設(shè)樣品中含有某成分,通過 HPLC 檢測到對應(yīng)峰形,就能驗(yàn)證假設(shè)),這是科學(xué)研究的核心邏輯;
提升 “競爭力”:無論是繼續(xù)深造(導(dǎo)師更青睞能熟練使用基礎(chǔ)科研儀器的研究者),還是進(jìn)入企業(yè)(比如檢測機(jī)構(gòu)、藥企的研發(fā)崗,會用 HPLC 是重要加分項(xiàng)),這項(xiàng)技能都能讓你更有優(yōu)勢。

表4:掌握 HPLC 的價(jià)值意義表
對剛接觸實(shí)驗(yàn)室的人來說,高效液相色譜儀不是 “高高在上的精密設(shè)備”,而是陪伴你探索科學(xué)、積累經(jīng)驗(yàn)的 “實(shí)用伙伴”。剛開始操作時,難免會遇到色譜圖異常、儀器報(bào)錯等問題,但只要耐心琢磨、多向有經(jīng)驗(yàn)的人請教,慢慢就會從 “陌生困惑” 變成 “熟練應(yīng)用”。
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